उपयोग का उद्देश्य

डेंगू एनएस1 एजी-आईजीजी/आईजीएम कॉम्बो टेस्ट डेंगू वायरल संक्रमण के निदान में सहायता के लिए सीरम या प्लाज्मा में एंटीबॉडी (आईजीजी और आईजीएम) और डेंगू वायरस एनएस1 एंटीजन से डेंगू वायरस का गुणात्मक पता लगाने के लिए एक तीव्र क्रोमैटोग्राफिक इम्यूनोपरख है।

[सारांश]

डेंगू बुखार एक तीव्र वेक्टर जनित संक्रामक रोग है जो मच्छरों द्वारा प्रसारित डेंगू वायरस के कारण होता है।डेंगू वायरस के संक्रमण से अप्रभावी संक्रमण, डेंगू बुखार, डेंगू रक्तस्रावी बुखार, डेंगू रक्तस्रावी बुखार हो सकता है।डेंगू बुखार की विशिष्ट नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों में कुछ रोगियों में अचानक शुरुआत, तेज बुखार, सिरदर्द, मांसपेशियों, हड्डियों और जोड़ों में गंभीर दर्द, त्वचा पर लाल चकत्ते, रक्तस्राव की प्रवृत्ति, लिम्फ नोड का बढ़ना, सफेद रक्त कोशिका की संख्या में कमी, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया आदि शामिल हैं।यह बीमारी मूल रूप से उष्णकटिबंधीय और उपोष्णकटिबंधीय क्षेत्र में लोकप्रिय है, क्योंकि यह बीमारी एड्स मच्छर द्वारा फैलती है, इसकी लोकप्रियता कुछ मौसमी होती है, हर साल आमतौर पर मई ~ नवंबर में होती है, चरम जुलाई ~ सितंबर में होती है।नए महामारी क्षेत्र में, जनसंख्या आम तौर पर अतिसंवेदनशील होती है, लेकिन घटना मुख्य रूप से वयस्कों की होती है, स्थानिक क्षेत्र में घटना मुख्य रूप से बच्चों की होती है।

सिद्धांत

डेंगू एनएस1 एजी-आईजीजी/आईजीएम कॉम्बो टेस्ट सीरम या प्लाज्मा में डेंगू वायरस एंटीबॉडी (आईजीजी और आईजीएम) और डेंगू वायरस एनएस1 एंटीजन का पता लगाने के लिए एक गुणात्मक झिल्ली पट्टी आधारित इम्यूनोपरख है।

आईजीजी/आईजीएम परीक्षण के लिए: परीक्षण उपकरण में शामिल हैं: 1) एक बरगंडी रंग का संयुग्म पैड जिसमें कोलाइड गोल्ड (डेंगू संयुग्म) के साथ संयुग्मित डेंगू पुनः संयोजक लिफाफा एंटीजन होता है, 2) एक नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली पट्टी जिसमें दो परीक्षण लाइनें (टी 1 और टी 2 लाइनें) होती हैं और एक नियंत्रण रेखा (सी लाइन)।T1 लाइन को IgM एंटी-डेंगू का पता लगाने के लिए एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया जाता है, T2 लाइन को IgG एंटी-डेंगू का पता लगाने के लिए एंटीबॉडी के साथ लेपित किया जाता है।जब पर्याप्त मात्रा में परीक्षण नमूना परीक्षण कैसेट के नमूना कुएं में डाला जाता है, तो नमूना कैसेट में केशिका क्रिया द्वारा स्थानांतरित हो जाता है।आईजीजी एंटी-डेंगू, यदि नमूने में मौजूद है, तो डेंगू संयुग्मों से जुड़ जाएगा।इसके बाद इम्यूनोकॉम्प्लेक्स को टी2 बैंड पर पूर्व-लेपित अभिकर्मक द्वारा पकड़ लिया जाता है, जो एक बरगंडी रंग की टी2 लाइन बनाता है, जो डेंगू आईजीजी सकारात्मक परीक्षण परिणाम का संकेत देता है और हाल ही में या दोबारा संक्रमण का संकेत देता है।यदि नमूने में आईजीएम एंटी-डेंगू मौजूद है तो यह डेंगू संयुग्मों से जुड़ जाएगा।फिर इम्यूनोकॉम्प्लेक्स को टी1 लाइन पर लेपित अभिकर्मक द्वारा पकड़ लिया जाता है, जिससे बरगंडी रंग की टी1 लाइन बनती है, जो डेंगू आईजीएम सकारात्मक परीक्षण परिणाम का संकेत देती है और एक ताजा संक्रमण का संकेत देती है।किसी भी टी लाइन (टी1 और टी2) की अनुपस्थिति एक नकारात्मक परिणाम का सुझाव देती है।

एनएस1 परीक्षण के लिए: इस परीक्षण प्रक्रिया में, एंटी-डेंगू एनएस1 एंटीबॉडी को कैसेट के परीक्षण लाइन क्षेत्र में स्थिर किया जाता है।संपूर्ण रक्त/सीरम/प्लाज्मा नमूना को नमूने में अच्छी तरह से रखने के बाद, यह एंटी-डेंगू एनएस1 एंटीबॉडी लेपित कणों के साथ प्रतिक्रिया करता है जिन्हें नमूना पैड पर लगाया गया है।यह मिश्रण परीक्षण पट्टी की लंबाई के साथ क्रोमैटोग्राफिक रूप से स्थानांतरित होता है और स्थिर एंटी-डेंगू एनएस 1 एंटीबॉडी के साथ इंटरैक्ट करता है।यदि नमूने में डेंगू वायरस एनएस1 एंटीजन है, तो परीक्षण लाइन क्षेत्र में एक रंगीन रेखा दिखाई देगी जो सकारात्मक परिणाम का संकेत देगी।यदि नमूने में डेंगू वायरस एनएस1 एंटीजन नहीं है, तो इस क्षेत्र में नकारात्मक परिणाम का संकेत देने वाली रंगीन रेखा दिखाई नहीं देगी।

एक प्रक्रियात्मक नियंत्रण के रूप में काम करने के लिए, एक रंगीन रेखा हमेशा नियंत्रण रेखा क्षेत्र पर दिखाई देगी जो यह दर्शाती है कि नमूना की उचित मात्रा जोड़ दी गई है और झिल्ली विकिंग हो गई है।

भंडारण और स्थिरता

कमरे के तापमान पर या रेफ्रिजरेटेड (4-30℃ या 40-86℉) सीलबंद थैली में पैक करके स्टोर करें।परीक्षण उपकरण सीलबंद थैली पर मुद्रित समाप्ति तिथि के माध्यम से स्थिर है।

उपयोग होने तक परीक्षण सीलबंद थैली में ही रहना चाहिए।

नमूना संग्रह और तैयारी

1. डेंगू NS1 Ag-IgG/IgM कॉम्बो टेस्ट सीरम या प्लाज्मा पर किया जा सकता है।

2. नियमित नैदानिक ​​प्रयोगशाला प्रक्रियाओं का पालन करते हुए संपूर्ण रक्त, सीरम या प्लाज्मा नमूने एकत्र करना।

3. नमूना संग्रह के तुरंत बाद परीक्षण किया जाना चाहिए।नमूनों को लंबे समय तक कमरे के तापमान पर न छोड़ें।दीर्घकालिक भंडारण के लिए, नमूनों को -20℃ से नीचे रखा जाना चाहिए।

4. परीक्षण से पहले नमूनों को कमरे के तापमान पर लाएँ।परीक्षण से पहले जमे हुए नमूनों को पूरी तरह से पिघलाया जाना चाहिए और अच्छी तरह मिलाया जाना चाहिए।नमूनों को बार-बार जमाया और पिघलाया नहीं जाना चाहिए।

परीक्षण प्रक्रिया

परीक्षण से पहले परीक्षण, नमूना, बफर और/या नियंत्रण को कमरे के तापमान 15-30℃ (59-86℉) तक पहुंचने दें।

1. थैली खोलने से पहले उसे कमरे के तापमान पर लाएँ।परीक्षण उपकरण को सीलबंद थैली से निकालें और जितनी जल्दी हो सके इसका उपयोग करें।परीक्षण उपकरण को साफ और समतल सतह पर रखें।

2. आईजीजी/आईजीएम परीक्षण के लिए: ड्रॉपर को लंबवत पकड़ें और नमूने की 1 बूंद (लगभग 10μl) को परीक्षण उपकरण के नमूना कुएं (एस) में स्थानांतरित करें, फिर बफर की 2 बूंदें (लगभग 70μl) डालें और टाइमर शुरू करें।नीचे चित्रण देखें.

3. एनएस1 परीक्षण के लिए: ड्रॉपर को लंबवत पकड़ें और सीरम या प्लाज्मा (लगभग 100μl) की 8 ~ 10 बूंदें परीक्षण उपकरण के नमूना कुएं (एस) में स्थानांतरित करें, फिर टाइमर शुरू करें।नीचे चित्रण देखें.

4. रंगीन रेखाओं के प्रकट होने की प्रतीक्षा करें।15 मिनट पर परिणाम पढ़ें.20 मिनट के बाद परिणाम की व्याख्या न करें।

परिणामों की व्याख्या

सकारात्मक:

आईजीजी/आईजीएम परीक्षण के लिए: नियंत्रण रेखा और कम से कम एक परीक्षण रेखा झिल्ली पर दिखाई देती है।टी2 परीक्षण लाइन की उपस्थिति डेंगू विशिष्ट आईजीजी एंटीबॉडी की उपस्थिति को इंगित करती है।टी1 परीक्षण लाइन की उपस्थिति डेंगू विशिष्ट आईजीएम एंटीबॉडी की उपस्थिति को इंगित करती है।और यदि T1 और T2 दोनों लाइनें दिखाई देती हैं, तो यह इंगित करता है कि डेंगू विशिष्ट IgG और IgM दोनों एंटीबॉडी की उपस्थिति है।एंटीबॉडी सांद्रता जितनी कम होगी, परिणाम रेखा उतनी ही कमजोर होगी।

NS1 टेस्ट के लिए: दो पंक्तियाँ दिखाई देती हैं।एक रेखा हमेशा नियंत्रण रेखा क्षेत्र (सी) में दिखाई देनी चाहिए, और दूसरी स्पष्ट रंगीन रेखा परीक्षण रेखा क्षेत्र में दिखाई देनी चाहिए।

नकारात्मक:

नियंत्रण क्षेत्र (सी) में एक रंगीन रेखा दिखाई देती है। परीक्षण रेखा क्षेत्र में कोई स्पष्ट रंगीन रेखा दिखाई नहीं देती है।

अमान्य: नियंत्रण रेखा प्रकट होने में विफल रहती है.अपर्याप्त नमूना मात्रा या गलत प्रक्रियात्मक तकनीक नियंत्रण रेखा विफलता के सबसे संभावित कारण हैं।प्रक्रिया की समीक्षा करें और एक नए परीक्षण उपकरण के साथ परीक्षण दोहराएं।यदि समस्या बनी रहती है, तो परीक्षण किट का उपयोग तुरंत बंद कर दें और अपने स्थानीय वितरक से संपर्क करें।